南京歐凱生物成功突破小分子夾心抗體技術(shù)開發(fā)壁壘?。?！
發(fā)布時(shí)間：2023-06-28
南京歐凱生物成功突破小分子夾心抗體技術(shù)開發(fā)壁壘，通過調(diào)整免疫策略、優(yōu)化抗體設(shè)計(jì)，開發(fā)出適用于夾心免疫分析的25-OH-VD抗體，經(jīng)客戶驗(yàn)證試劑與質(zhì)譜金標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果相關(guān)性高達(dá)0.945。25-OH-VD夾心抗體的成功開發(fā)，標(biāo)志著“IVD小分子夾心抗體技術(shù)革新”成功邁出第一步。這項(xiàng)抗體開發(fā)技術(shù)填補(bǔ)了小分子免疫夾心分析方法在臨床應(yīng)用的空白，有效提高了免疫檢測與質(zhì)譜金標(biāo)檢測結(jié)果的一致性。后續(xù)南京歐凱生物還將推出AⅠ、AⅡ、ALD、Prog、E2、FA等熱門小分子檢測項(xiàng)目，敬請期待！
25-OH-VD夾心試劑檢測結(jié)果比標(biāo)質(zhì)譜金標(biāo)準(zhǔn)
為提高25-OH-VD免疫檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，南京歐凱生物CLIA夾心法試劑大包裝（Q80h1）生產(chǎn)對標(biāo)的是行業(yè)檢測金標(biāo)準(zhǔn)——LC-MS/MS。經(jīng)檢測南京歐凱生物25-OH-VD夾心抗體與25-OH-VD2、25-OH-VD3有很好的交叉反應(yīng)性，可有效識(shí)別樣本中的總25-OH-VD。試劑大包裝在AE化學(xué)發(fā)光平臺(tái)，自測結(jié)果與質(zhì)譜檢測結(jié)果相關(guān)性（R2）為0.9153，客戶驗(yàn)證結(jié)果與質(zhì)譜檢測結(jié)果相關(guān)性（R2）高達(dá)0.945。
圖1. 自測樣本符合率
圖2. 客戶測樣本符合率
圖3. 夾心抗體總25-OH-VD識(shí)別能力
為什么CLIA競爭法不適于25-OH-VD檢測
與質(zhì)譜檢測結(jié)果一致性差
中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科與中日友好醫(yī)院檢驗(yàn)科研究人員對市場上主流五大品牌（雅培、DiaSorin、IDS、羅氏、西門子）的25-OH-VD檢測試劑進(jìn)行了比對，發(fā)現(xiàn)這些試劑的檢測結(jié)果與LC-MS/MS檢測結(jié)果臨床判定一致率不到71%（見表1）。
表1. 不同CLIA競爭法與LC-MS/MS臨床判定一致性
| 廠家 | 所有樣本（245份） | |||
| ＜20ng/mL N（%） |
20~30ng/mL N（%） |
＞30ng/mL N（%） |
一致率 | |
| LC-MS/MS | 99（40.4） | 68（27.8） | 77（31.4） | — |
| A | 115（46.9） | 79（32.3） | 51（20.8） | 68.60% |
| B | 127（51.8） | 94（38.4） | 24（9.8） | 64.90% |
| C | 95（38.8） | 104（42.4） | 46（18.8） | 67.80% |
| D | 121（49.4） | 79（32.2） | 45（18.4） | 70.60% |
| E | 39（15.9） | 72（29.4） | 134（54.7） | 51.80% |
注：A、B、C、D、E依次代表雅培、DiaSorin、IDS、羅氏、西門子。其中雅培、IDS和西門子采用的是AE化學(xué)發(fā)光競爭法，DiaSorin采用的是異魯米諾衍生物直接化學(xué)發(fā)光競爭法，Roche采用的是電化學(xué)發(fā)光競爭法。
25-OH-VD2識(shí)別不佳
25-OH-VD2識(shí)別不佳可能是影響CLIA競爭法與LC-MS/MS檢測結(jié)果一致性差的主要原因之一。無論何種CLIA體系，當(dāng)樣本中含有25-OH-VD2時(shí)，競爭法與LC-MS/MS檢測結(jié)果的相關(guān)性均下降（見表2）。
表2. 25-OH-VD2含量對CLIA競爭法檢測結(jié)果的影響
| 樣本 | 斜率 | 95% CI | 截距 | 95% CI | r值 | 95% CI | 偏差 | 95% CI | 偏差% | 95% CI |
| 不含25-0H-VD?（154份） | ||||||||||
| A | 0.96 | 0.90~1.01 | 2.05 | 1.16~3.19 | 0.917 | 0.887~0.939 | 1.0 | 0.3~1.7 | 8.6 | 4.9~12.3 |
| B | 0.83 | 0.79~0.88 | 1.61 | 0.92~2.21 | 0.930 | 0.905~0.948 | -2.5 | -3.2~-1.8 | -8.7 | -11.9~-5.5 |
| C | 0.68 | 0.63~0.73 | 8.83 | 7.80~9.97 | 0.885 | 0.845~0.915 | 1.7 | 0.8~2.7 | 18.2 | 13.0~23.4 |
| D | 0.95 | 0.89~1.02 | 1.08 | -0.07~2.02 | 0.909 | 0.877~0.933 | -0.5 | -1.3~0.3 | -1.2 | -5.0~2.6 |
| E | 1.29 | 1.17~1.42 | 5.34 | 2.94~7.47 | 0.848 | 0.796~0.887 | 10.8 | 9.5~12.1 | 44.7 | 39.8~49.7 |
| 含有25-OH-VD?（91份） | ||||||||||
| A | 0.66 | 0.56~0.75 | 4.41 | 1.80~6.92 | 0.804 | 0.717~0.867 | -5.3 | -6.5~-4.1 | -19.9 | -24.8~15.0 |
| B | 0.78 | 0.70~0.87 | -0.4 | -2.63~1.68 | 0.854 | 0.787~0.902 | -6.8 | -7.8~-5.7 | -30.1 | -34.2~26.0 |
| C | 0.77 | 0.68~0.86 | 2.51 | 0.05~4.61 | 0.845 | 0.773~0.895 | -3.8 | -4.8~-2.7 | -14.0 | -18.4~-9.7 |
| D | 1.03 | 0.90~1.17 | -5.48 | -9.10~-2.51 | 0.819 | 0.738~0.877 | -5.0 | -6.2~-3.8 | -25.0 | -30.2~-19.7 |
| E | 1.47 | 1.16~1.92 | -1.70 | -13.59~5.86 | 0.626 | 0.482~0.737 | 11.3 | 8.7~13.8 | 33.8 | 27.5~40.1 |
| 總樣本（245份） | ||||||||||
| A | 0.85 | 0.78~0.91 | 2. 84 | 1.68~3.80 | 0.848 | 0.808~0.880 | -1.3 | -2.1~-0.6 | -2 | -5.4~1.4 |
| B | 0.78 | 0.73~0.82 | 1.58 | 0.77~2.31 | 0.894 | 0.866~0.920 | -4.1 | -4.7~-3.5 | -16.6 | -19.4~-13.8 |
| C | 0.67 | 0.62~0.72 | 7.54 | 6.38 ~8.44 | 0.841 | 0.800~0.874 | -0.3 | -1.1~0.5 | 6.2 | 2.1~10.4 |
| D | 0.93 | 0.87~1.00 | -0.31 | -1.43~0.61 | 0.866 | 0.831~0.894 | -2.2 | -2.9~-1.5 | -10.0 | -13.4~-6.6 |
| E | 1.30 | 1.18~1.43 | 4.04 | 1.81~6.44 | 0.776 | 0.721~0.822 | 11.0 | 9.7~12.2 | 40.7 | 36.7~44.6 |
注：表2中數(shù)據(jù)為與LC-MS/MS的比較結(jié)果；表1、表2數(shù)據(jù)來源于參考文獻(xiàn)——禹松林,邱玲,方慧玲,等. 五種自動(dòng)化免疫學(xué)方法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法測定25羥維生素D的比較[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2015(7): 5.
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